L’analyse WPC a été conçue pour classifier davantage les échantillons initialement marqués positifs pour "Blasts/Abn Lympho ?" par l’analyse DIFF. L'analyse WPC exclut les échantillons contenant des cellules potentiellement malignes avec une grande spécificité, ce qui permet de minimiser le nombre d'échantillons qui ont été précédemment marqués comme potentiellement malins par l'analyse DIFF. La combinaison des analyses DIFF et WPC permet une différenciation optimale entre les échantillons avec suspicion de malignité et les échantillons avec suspicion de contexte réactionnel.

Le canal WPC permet de classer les échantillons suspects dans l'une des trois catégories clairement définies ("réactionnel", "suspecté d'être malin" ou "négatif"). Cela permet aux laboratoires de classer tous les échantillons dans l'une de ces catégories et de caractériser davantage les conditions réactionnelles, une fois qu'une condition maligne a été exclue.

Web Image Illustration Diagram DIFF WPC — La combinaison des analyses DIFF et WPC permet une approche à deux niveaux pour classer les échantillons dans trois catégories différentes et bien définies : négatifs, réactionnels (alarme "Atypical Lympho ?") et suspectés d'être malins (alarme "Blasts ?" et/ou alarme "Abn Lympho ?").

Ce marquage affiné permet de rationaliser et d'accélérer le workflow du laboratoire, car il réduit la nécessité d'effectuer des analyses de suivi coûteuses en temps et en argent qui sont nécessaires lorsqu'une hémopathie maligne est suspectée. En outre, il contribue à réduire le travail manuel (par exemple, pour les frottis) du personnel de laboratoire et lui donne davantage d'indications sur les cellules pathologiques à rechercher dans un échantillon particulier.

Le concept WPC nécessite la présence du canal WPC disponible sur certains analyseurs XN et XR-Series et utilise la technologie de la fluorocytométrie en flux.

Avec la licence optionnelle XN-Stem Cells (paramètre HPC), le canal WPC peut également être utilisé pour quantifier les cellules progénitrices hématopoïétiques.

Analyse WBC en fluorocytométrie en flux

La réaction provoquée par les réactifs dédiés dans le canal WPC dépend spécifiquement de la composition des lipides membranaires. Les globules blancs matures ont une composition lipidique membranaire différente de celle des cellules immatures ou réactionnelles, de sorte qu'ils sont affectés dans une plus large mesure, laissant les cellules à un stade moins natif. La membrane cellulaire devient alors plus perméable au fluorochrome exclusif qui marque l'ADN du noyau à l'étape suivante de la réaction. Les signaux correspondant à la taille des cellules, à leur structure interne et à leur teneur en acide nucléique sont donc directement liés à la fonctionnalité des cellules.

En raison de la composition lipidique de leur membrane, les blastes ne sont pas très fortement perméables au réactif de lyse. Par conséquent, ils présentent des signaux de fluorescence relativement faibles et des signaux de lumière diffusée vers l'avant élevés parce qu'ils restent en grande partie intacts.

Les lymphocytes néoplasiques, en revanche, sont plus matures et leurs membranes sont plus facilement perméables, ce qui entraîne des signaux de fluorescence plus élevés et des signaux de lumière diffusée vers l'avant plus faibles en raison du rétrécissement de la cellule. Ces différences permettent une identification fiable des cellules malignes suspectes.

La figure ci-dessous montre différentes vues des scattegrammes du canal WPC. Le groupe rouge dans le scattergramme de gauche représente une population de lymphocytes anormaux, tandis que le scattergramme WPC (SSC-FSC) de droite illustre une population de blastes (couleur rouge) présente dans l'échantillon. En outre, les images connexes des scattergrammes 3D (XR-Series uniquement) sont présentées ci-dessous.

Scattergramme WPC

Loading 3D-Element

Scattegramme WPC Blast

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XR-Series utilise des signaux provenant de la diffusion de la lumière laser à deux angles (FSC et SSC) et des signaux de fluorescence (SFL). Chaque cellule sanguine détectée possède ses propres valeurs de coordonnées x, y et z représentant respectivement le signal FSC, SSC et SFL. Grâce à des algorithmes avancés, XR-Series est capable d'identifier et de regrouper les types cellulaires, en particulier les cellules anormales, en fonction de leur taille, de leur complexité interne et de leur contenu en ADN/ARN. Le résultat de cette analyse se reflète sur les scattergrammes 3D, qui peuvent pivoter dans toutes les directions pour inspecter les populations cellulaires sous différents angles.

Bénéfices pour les laboratoires et les cliniciens

L'analyse WPC permet de minimiser le nombre d'échantillons finalement identifiés comme potentiellement malins et simplifie ainsi le flux de travail du laboratoire en réduisant la nécessité d'effectuer des tests longs et coûteux en cas de suspicion d'une hémopathie maligne.
Vous pouvez être sûr de réaliser des frottis sur les bons échantillons sans perdre de temps sur les faux positifs. L'examen des frottis est accéléré en se concentrant sur des populations cellulaires spécifiques.
L'analyse WPC est effectuée en tant que test réflexe automatisé, ce qui permet d'augmenter le temps d'intervention.
La mesure des cellules réactionnelles (Paramètres Etendus de l’Inflammation (EIP), licence optionnelle) permet aux cliniciens de mieux comprendre l'état de la réponse immunitaire, en particulier après avoir exclu les pathologies malignes grâce à l'analyse WPC.
Avec la licence optionnelle XN-Stem Cells (paramètre HPC), vous pouvez quantifier les cellules progénitrices hématopoïétiques, ce qui peut contribuer au service du laboratoire qui gère les transplantations de cellules souches hématopoïétiques (HSCT) sur site en déterminant le moment optimal pour les procédures d'aphérèse.